Long Noncoding RNA High Expression in Hepatocellular Carcinoma Facilitates Tumor Growth Through Enhancer of Zeste Homolog 2 in Humans

日期：2016-04-19 标签：lncRNA-HEIH,EZH2

lncRNA HEIH与蛋白EZH2互作

文章研究思路

核心Figure

Figure说明：Figure主要阐述的是lncRNA HEIH与蛋白EZH2的相互作用。A：RIP实验。利用EZH2抗体，在Huh-7细胞和HCCLM3细胞中，钓取与蛋白EZH2结合的lncRNA，qPCR检测，结果证实蛋白EZH2与lncRNA HEIH有相互作用（Ab-1和Ab-2为lncRNA HEIA的两个检测位点）。B：将A图结果数据化。 C：利用RIP实验验证蛋白actin和AK055007与lncRNA HEIA无相互作用，作为A图对照。D：作为A图的反向验证，用RNA pull down验证lncRNA HEIH与蛋白EZH2有相互作用。E：利用RNA pull down进一步验证蛋白EZH2与 lncRNA HEIH结合区域。

我们公司可以提供的技术服务

一、RIP

RIP(RNA 免疫共沉淀)技术，主要­­研究蛋白与RNA的相互作用，主要原理是利用特定的蛋白抗体，在全蛋白提取液中捕获特定蛋白，特定蛋白含有与之结合的RNA，洗脱RNA，反转录，qPCR检测。我公司在实验体系中设置阳性及阴性对照，进一步排除系统误差。

二、RNA pull down

RNA pull down技术，主要研究lncRNA与蛋白的相互作用，主要原理是体外转录生物素标记的RNA，标记有生物素的RNA吸附到链霉亲和磁珠上，RNA与全蛋白提取液孵育，捕获互作的蛋白，后续进行银染-质谱或Western检测。我公司在实验体系中同时提供lncRNA正义链与反义链的pull down。

三、预测lncRNA与蛋白互作位点

通过相关的预测软件预测lncRNA的结合位点，根据结合位点设计实验方案，利用RNA pull down实验，进一步验证蛋白与lncRNA的结合区域。

      原文链接：Long Noncoding RNA High Expression in Hepatocellular Carcinoma Facilitates Tumor Growth Through Enhancer of Zeste Homolog 2 in Humans （提取码：21b3）

来源：360云盘