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实验技术流程

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实验常见问题

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结果分析

      对于一幅RIP-qRT-PCR实验结果Figure，应包含位点作用示意图、qRT-PCR结果数据分析图，并应在Supplement中补充相关的验证性实验图片，具体如下图所示。

      RNA与蛋白绑定结合位点。经过一定处理，RNA原本以双链茎环结构，不结合RBP蛋白和miRNA，经过处理后茎环结构打开，一条链结合RBP，另外一条链结合miRNA和RISC。

      Figure A：

      某基因的引物设计位点。

      Figure B：

      上图：RNA结合蛋白，与未处理（Mock）组比较经过处理（Treat）后位点1、2结合量明显大量增加；下图：RBP IP组，阴性对照组Mock IgG IP,阳性对照组SNRNP70 IP。

      Supplement：

      WB检测RNA结合蛋白的表达。

• 1 . 基因表达调控概述
  • 1.1. 转录调控与转录激活
  • 1.2. 转录后调控
  • 1.3. miRNA与lncRNA
• 2 . 基因表达调控研究进展
• 3 . 基因表达调控研究方法
• 4 . 基因表达调控主要实验技术
  • 4.1. 染色质免疫沉淀技术 ChIP
  • 4.2. RNA结合蛋白免疫沉淀技术 RIP
  • 4.3. RNA pull-down
  • 4.4. DNA pull-down
  • 4.5. 荧光素酶检测技术 Luciferase
  • 4.6. 凝胶迁移/电泳迁移率实验 EMSA