dCas9定点调控表观遗传

概要

1.设计sgRNA

2.构建sgRNA表达载体

3.构建dCas9-p300组蛋白乙酰化系统，dCas9-LSD1组蛋白去甲基化系统，dCas9-Tet1-CD DNA去甲基化系统，dCas9-DNMT3A DNA甲基化系统

4.建立dCas9-SAM稳转株、dCas9-KRAB稳转株

5 .转染sgRNA

6 .ChIP检测dCas9系统的靶向效率

7 .qPCR或WB检测下游基因表达

• 1 . CRISPR-Cas9基因沉默
• 2 . CRISPR-Cas9基因敲入
• 3 . dCas9定点调控表达
• 4 . dCas9定点调控表观遗传
• 5 . dCas9介导转录调控