The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

日期：2016-09-01 标签：H19,miR138,miR200a

The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

在结肠癌细胞中lncRNA H19作为miRNA的海绵体促进EMT进程

（IF=5.0）

文章思路：

H19作为miR-138、miR-200a的海绵吸附体，即ceRNA(内源性竞争RNA)，通过调节miR-138、miR-200a，来调节Vimentin、ZEB1与ZEB2的表达，从而调节EMT进程。

核心Figure：

A图：构建过表达H19稳转株（HT29/SW620细胞），B图：H19过表达细胞形态（HT29/SW620细胞），间充质细胞更接近于长梭形，细胞极性更小，C图：western检测EMT过程中的标志性蛋白，Ecadherin 蛋白表达下降，Vimentin蛋白表达上升。D、E图：Transwell实验，间充质细胞具有更强的细胞迁移能力。

A图：AGO2-RIP，主要用于验证microRNA与lncRNA互作。B图：生物信息学预测miR138与miR200a与 H19的结合位点，C图：qPCR检测miR138与miR200a对H19的mRNA的影响，miRNA不会影响其ceRNA的表达。D图：luciferase验证miR138与miR200a与H19的结合活性。

A图：qPCR检测miR138对 Vimentin的mRNA表达水平的影响。B图：western检测miR138对 Vimentin的蛋白表达水平的影响C图：luciferase实验验证miR138与Vimentin 编码区的结合。A、B、C图miR138对 Vimentin的编码区结合，并降解Vimentin的mRNA. D图：qPCR检测H19过表达细胞中Vimentin的mRNA表达水平，E图：western检测H19过表达细胞中Vimentin的蛋白表达水平。luciferase实验验证H19过表达细胞对Vimentin 编码区的的影响。

本公司可进行类似实验的实验设计及整体实验外包项目。实验项目可包括慢病毒稳转株的建立（过表达/敲低），qPCR、western、细胞功能实验（Transwell、细胞增殖-CCK8、划痕、细胞流式-周期/凋亡检测等）AGO2-RIP、生物信息学预测、luciferase。（红色标识为我公司主营项目）

原文链接:https://yunpan.cn/cMtL7gS4WAH2i （提取码：82da）