DNA pull-down

针对目标区域设计特异性DNA探针并经过脱硫生物素标记，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。然后，细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除；最后，经洗脱液洗脱，得到目的DNA探针-蛋白质复合物，再经过Western Blot或质谱（MS）鉴定蛋白质类型。

在DNA pull-down实验过程中我们设置一系列的质控标准以确保每一步实验的真实有效，如DNA探针跑胶检测、产物银染图。具体示例如下图所示：

上图为DNA探针跑胶图，保证了DNA探针的质量。

DNA pull-down产物通过跑胶银染检测实验组与对照组是否含有差异条带，以确保结果的可靠性。

DNA pull-down实验结果一般为产物的WB验证或MS分析数据，下图为DNA pull-down产物的WB结果示例。

用非生物素标记的DNA探针作为阴性对照，表明目的DNA片段能与预测的靶标蛋白结合。

• 1 . 基因表达调控
  • 1.1. 表观遗传修饰调控
  • 1.2. 转录水平调控
  • 1.3. 转录后水平调控
• 2 . 基因表达调控实验技术
  • 2.1. CHIP 染色质免疫沉淀技术
  • 2.2. RIP RNA结合蛋白免疫沉淀技术
  • 2.3. CHIRP 免疫共沉淀实验
  • 2.4. CLIP实验技术
  • 2.5. RNA pull-down
  • 2.6. DNA pull-down
  • 2.7. RNA-RNA pull-down
  • 2.8. Luciferase 荧光素酶实验
  • 2.9. DNA/RNA EMSA 凝胶电泳迁移实验
  • 2.10. FISH 免疫荧光原位杂交技术
  • 2.11. ​核质分离