The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

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The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

在结肠癌细胞中lncRNA H19作为miRNA的海绵体促进EMT进程

IF=5.0

 

文章思路:

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H19作为miR-138miR-200a的海绵吸附体,即ceRNA(内源性竞争RNA),通过调节miR-138miR-200a,来调节VimentinZEB1ZEB2的表达,从而调节EMT进程。

 

核心Figure

 

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A图:构建过表达H19稳转株(HT29/SW620细胞),B图:H19过表达细胞形态(HT29/SW620细胞),间充质细胞更接近于长梭形,细胞极性更小,C图:western检测EMT过程中的标志性蛋白,Ecadherin 蛋白表达下降,Vimentin蛋白表达上升。DE图:Transwell实验,间充质细胞具有更强的细胞迁移能力。

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A图:AGO2-RIP,主要用于验证microRNAlncRNA互作。B图:生物信息学预测miR138miR200a H19的结合位点,C图:qPCR检测miR138miR200aH19mRNA的影响,miRNA不会影响其ceRNA的表达。D图:luciferase验证miR138miR200aH19的结合活性。

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A图:qPCR检测miR138 VimentinmRNA表达水平的影响。B图:western检测miR138 Vimentin的蛋白表达水平的影响C图:luciferase实验验证miR138Vimentin 编码区的结合。ABCmiR138 Vimentin的编码区结合,并降解VimentinmRNA. D图:qPCR检测H19过表达细胞中VimentinmRNA表达水平,E图:western检测H19过表达细胞中Vimentin的蛋白表达水平。luciferase实验验证H19过表达细胞对Vimentin 编码区的的影响。

 

本公司可进行类似实验的实验设计及整体实验外包项目。实验项目可包括慢病毒稳转株的建立(过表达/敲低)qPCRwestern细胞功能实验Transwell、细胞增殖-CCK8、划痕、细胞流式-周期/凋亡检测等)AGO2-RIP、生物信息学预测、luciferase(红色标识为我公司主营项目)

原文链接:https://yunpan.cn/cMtL7gS4WAH2i (提取码:82da)



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